實驗室三級生物安全防護是為處理危險度Ⅲ級微生物和大容量或高濃度的、具有高度氣溶膠擴散危險的危險度Ⅱ級微生物的工作而設計的，其首先必須達到一級和二級生物安全水平的防護，并對以下內容作了更嚴格的要求:

1、實驗室進入準許  

實驗室入口門上具有國際生物危害警告標志，注明生物安全級別以及管理實驗室出入的負責人姓名，說明進入該區域的所有特殊條件，如免疫接種狀況。

2、個人安全防護

（1）實驗室防護服必須為正面不開口的或反背式的隔離衣、清潔服、連體服、帶帽的隔離衣，必要時穿著鞋套或專用鞋。不得使用前系扣式實驗服。實驗室防護服必須在清除污染后再清洗。當操作某些感染性病原體時，可脫下日常服裝換上專用的實驗服。

（2）開啟各種潛在感染性物質的操作均必須在生物安全柜或其他基本防護設施中進行。

（3）有些實驗室操作，或進行受感染動物操作時，必須配備呼吸防護裝備。

3、實驗室基本要求

（1）實驗室設隔離區和隔離門，或經緩沖間進入。緩沖間是一個在實驗室和鄰近空間保持壓差的專門區域，其中應設有分別放置潔凈衣服和臟衣服的設施，而且也可能需要有淋浴設施。緩沖間的門可自動關閉且互鎖，確保某一時間只有一扇門是開著的。應當配備能擊碎的面板供緊急撤離時使用。

（2）實驗室為密封空間，建有空氣管道通風系統以進行氣體消毒。窗戶應關閉、密封、防碎。實驗室的墻面、地面和天花板必須防水，并易于清潔。

（3）實驗室每個出口附近安裝非手控制式的洗手池。

（4）具有空氣定向流動的可控通風系統，并有直觀的監測系統，監測系統可帶也可不帶警報系統。

（5）通風系統保證從三級生物安全實驗室內排出的空氣不會逆流至該建筑物內的其他區域。空氣經高效空氣過濾器過濾、更新后，方可在實驗室內再循環使用。當實驗室空氣（來自生物安全柜的除外）排出到建筑物外時，遠離該建筑及進氣口。根據所操作的微生物因子不同，空氣可以經HEPA過濾器過濾后排放。注意防止實驗室出現持續正壓，可采取取暖、通風和空調系統（HVAC），并安裝視聽警報器以監測系統故。應注意所有的HEPA過濾器均可進行氣體消毒和檢測。

（6）生物安全柜的安裝位置應遠離人員活動區，且避開門和通風系統的交叉區。避免干擾安全柜的空氣平衡及建筑物排風系統的設置。

（7）實驗室配置用于污染廢棄物消毒的高壓滅菌器。如果感染性廢棄物需運出實驗室處理，則必須根據國家或國際的相應規定，密封于不易破裂的、防滲漏的容器中。

（8）供水管必須安裝防逆流裝置。真空管道和真空泵應采用裝有液體消毒劑的防氣閥和HEPA過濾器進行保護。

（9）三級生物安全水平的防護實驗室設施設計和操作規范應予存檔。